RNase A

BR级，仅供研究使用

货号：N9047

规格：1g

比活性：≥3000U/mg蛋白（≥60Kunitz单位/mg蛋白）。

形式：含有1 g RNase A，冻干粉末

产品说明

RNase A是一种内切核糖核酸酶，分子量为13.7 kDa（单体），可在C和U残基位置特异性降解单链RNA。该酶可以切割核苷酸5’-核糖与邻近嘧啶核苷3’-核糖上磷酸基团之间的磷酸二酯键，产生的2’, 3’-环磷酸可以水解成相应的3’-核苷磷酸盐。

RNase A推荐工作浓度1-100 μg/ml，因应用类型的不同而异。该酶在多种反应条件下均有活性。低盐离子浓度时（0-100 mM NaCl），RNase A可以切割单链RNA、双链RNA、以及RNA/DNA杂合子中的RNA；然而，当NaCl浓度大于300 mM时，RNase A则特异性切割单链RNA。

应用

——质粒和基因组DNA的制备

——从重组蛋白制剂中去除RNA

——核糖核酸酶保护试验

——定位DNA或RNA中的单碱基突变

保存条件

4℃保存。在密封和干燥条件下储存的保质期为三年。RNase A粉末可在室温下运输。

质量控制

功能检测方法为质粒DNA提取过程中的RNA降解。

活性单位的定义

当酵母RNA在37°C和pH 5.0下被水解时，一个单位的酶在260 nm处导致吸光度增加1.0。

50U大约相当于1个Kunitz单位。

抑制和失活
-抑制剂：最有效的抑制剂是来自哺乳动物细胞细胞质中的~50 kDa蛋白，如核boLock™RNase抑制剂。
-其他抑制剂：尿苷2’,3’-环钒酸盐、5’-二磷酸腺苷3’-磷酸盐和5’-二磷酸腺苷2’-磷酸盐(2)、SDS、焦碳酸二乙酯、4M胸氰酸胍加0.1M 2-巯基乙醇和重金属离子。

-用苯酚/氯仿萃取法灭活。

-在95°C下加热10分钟后灭活。

本品仅供科学研究使用。